自噬（Autophagy）是调节真核细胞生长、死亡和能量代谢的重要生物学机制。细胞自噬行使其生物学功能的前提是自噬流（Autophagic Flux）的活化。大量证据表明自噬流受损与多种慢性炎性疾病，特别是肿瘤、神经退行性疾病及组织纤维化的发病密切相关，目前对于自噬流的检测是自噬与其相关疾病研究领域的热点。

什么才是活细胞自噬分析金标准呢？作为专业的生命科学医药原料供应商，kok全站app官网登录-Kok全站官网登录 科技为您推荐Enzo Life Sciences（Enzo）荣誉出品，Nature/Cell海量引用，升级款- CYTO-ID自噬检测试剂盒(CYTO-ID Autophagy detection kit 2.0)

*** 该产品仅用于科研实验.

CYTO-ID Autophagy Detection Kit 2.0 使用新型染料检测自噬小泡和监控活细胞自噬流，选择性标记积累的自噬小泡。染料已通过优化，不染溶酶体，在自噬前体、自噬体和自噬溶酶体里呈现出明亮的荧光。该试剂盒提供了一种无需细胞转染，可以在活细胞中监控细胞自噬的快速定量方法。

• 原理：

该产品所用探针是阳离子两亲性示踪剂（CAT）染料，以类似诱导磷脂药物的方式迅速进入到细胞中。染料的功能基团能够选择性标记与自噬通路相关的小泡，而不会在溶酶体中聚集。胞内物质被扩大的膜囊包裹，吞噬泡形成双层膜囊泡，成为自噬体。自噬体外膜随后与溶酶体融合，和内部物质被自噬性溶酶体降解。

• 优势：

• 更明亮，更耐光，特异性染色自噬小泡

• 无需转染及转染效率验证

• 快速量化原生异质性细胞群中的自噬

• 不染溶酶体，减少其他染料的背景干扰

• 便于高通量筛选自噬激活剂和抑制剂

• 应用：

• - 新老替代：

* 用量说明：以ENZ-KIT175-0200为例，流式分析（200次）；荧光显微镜（250次）；96孔板（3*96well）

• ，ENZ-KIT175，Nature/Cell文章鉴赏：

①Nature文章：Tian, W., Alsaadi, R., Guo, Z. et al. An antibody for analysis of autophagy induction. Nat Methods 17, 232–239 (2020).

【摘要】自噬是一种维持细胞稳态的降解程序。自噬缺陷在许多疾病中都有描述。然而，由于目前可用的用于测量自噬诱导的工具的局限性，自噬率的分析可能具有挑战性，特别是在稀有细胞群或体内。在这里，我们描述了一种通过测量蛋白质 ATG16L1 的磷酸化来监测自噬的方法。我们开发并表征了一种单克隆抗体，可以检测哺乳动物细胞中的内源性磷酸化 ATG16L1。重要的是，磷酸-ATG16L1 仅存在于新形成的自噬体上。因此，其水平不受长期压力或晚期自噬阻滞的影响，这可能会混淆自噬分析。此外，我们表明 ATG16L1 磷酸化是一种保守的信号通路，由许多自噬诱导应激源激活。所述抗体适用于免疫印迹、免疫荧光和免疫组织化学，测量的磷酸化 ATG16L1 水平直接对应于自噬率。总之，这种磷酸化抗体代表了研究自噬诱导的令人兴奋的工具。

② Cell文章：Zhou, Ben et al. "Mitochondrial Permeability Uncouples Elevated Autophagy and Lifespan Extension". Cell vol. 177,2 (2019):

【摘要】自噬在延长寿命的不同范例中是必需的，这导致了一种普遍的观念，即自噬有益于长寿。然而，为什么自噬在某些情况下是有害的仍然无法解释。在这里，我们表明线粒体通透性定义了自噬对衰老的影响。由于线粒体通透性增加，缺乏血清/糖皮质激素调节激酶-1 (sgk-1) 的秀丽隐杆线虫的自噬升高出人意料地缩短了寿命。在 sgk-1 突变体中，降低自噬水平或线粒体通透性转换孔 (mPTP) 开口可恢复正常寿命。值得注意的是，在所有检查自噬依赖性寿命延长的范例中都需要低线粒体通透性。遗传诱导的 mPTP 开放阻断了由热量限制或生殖系干细胞丢失导致的自噬依赖性寿命延长。线粒体通透性同样将自噬转化为哺乳动物的破坏力，因为肝脏特异性 Sgk 敲除小鼠表现出肝细胞自噬、mPTP 开放和缺血/再灌注损伤死亡的显着增强。靶向线粒体通透性可以最大限度地发挥自噬在衰老中的作用。

已发表文章（尚有几百篇未展示）：

• Thongon, Natthakan, et al. "Hematopoiesis under telomere attrition at the single-cell resolution." Nature communications 12.1(2021)

• Cabezudo, Sofía, et al. "Gαq activation modulates autophagy by promoting mTORC1 signaling." Nature communications 12.1(2021): 1-19.

• Tian, W., Alsaadi, R., Guo, Z. et al. An antibody for analysis of autophagy induction. Nat Methods 17, 232–239 (2020)

• Zhou, Ben et al. "Mitochondrial Permeability Uncouples Elevated Autophagy and Lifespan Extension". Cell  vol.177,2 (2019)

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